Les modifications des anomalies chromosomiques des tumeurs humaines
avec l'évolution ont rarement pu être suivies " in vivo". Il est en effet
relativement exceptionnel que l'examen cytogénétique d'une tumeur puisse
être effectué à plusieurs reprises chez un même malade. Les observations
publiées ainsi que celles des leucémies étudiées de façon séquentielle
concernent en général des malades traités par chimio- ou radio-thérapie.
C'est la raison pour laquelle il nous a semblé intéressant de rapporter une
observation de mélanome malin dont l'examen cytogénétique a pu être fait à
trois reprises, le traitement ayant été exclusivement chirurgical.
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Observation
Mme N. B..., née le 4 novembre 1941 a subi l'ablation d'une
adénopathie axillaire gauche dont l'examen histologique a montré qu'il
s'agissait d'une métastase de mélanome malin, trois semaines avant de
consulter à l'Institut Gustave Roussy, le 14 avril 1965. On trouve alors à
l'examen clinique des petits naevus disséminés sur tout le corps, dont aucun
ne présente de signes de transformation et le point de départ de la tumeur ne
peut être décelé. Cependant un petit naevus d'un millimètre de diamètre,
assez pigmenté, situé sur le quadrant supéro-externe du sein gauche et une
petite tumeur mollasse rougeâtre de la face externe du deltoïde paraissent
justifier un examen histologique. L'exérèse, faite le 27 avril 1965 est
suivie d'électro-coagulation. L'examen histologique montre l'absence de signes
de malignité, quoique "l'intensité de la prolifération" du naevus mammaire
"commande la surveillance de cette lésion" (Dr Weill).
Le 12 août 1965, on découvre une adénopathie axillaire gauche qui
fait pratiquer le 23 du même mois un curage axillaire gauche étendu. Sur 21
ganglions prélevés, 17 sont le siège de métastases d'un mélanome
malin.
La malade sera dés lors suivie régulièrement à l'Institut Gustave
Roussy et va subir plusieurs interventions chirurgicales : le 16 octobre 1969,
on découvre une adénopathie sous-claviculaire gauche assez volumineuse, qui
est enlevée le 3 novembre 1969. Histologiquement il s'agit d'une métastase de
mélanome malin presque entièrement achromique. Le 8 janvier 1970 on découvre
à nouveau une adénopathie sus-claviculaire gauche et un curage chirurgical
complet est fait le 8 avril 1970. Onze ganglions individualisés sont le siège
d'une métastase de mélanome malin (Dr Prade). Le 16 septembre 1970 on
découvre une adénopathie jugula-carotidienne gauche qui nécessite un curage
cervical gauche, effectué le 25 septembre 1970. Les ganglions prélevés sont,
là encore, le siège de métastases (Dr Weill).
Le 6 novembre 1970 une adénopathie spinale est décelée, qui est
enlevée le 17 novembre 1970 L'examen histologique montre qu'il s'agit d'une
métastase massive de mélanome malin.
En résumé, évolution pendant 5 ans 8 mois chez une femme jeune,
d'une mélanome malin avec récidives loco-régionales multiples. Aucun
traitement antimitotique n'a été appliqué. L'irradiation reçue par la
malade est le fait d'examens complémentaires : une mammographie et onze
clichés thoraciques jusqu'au 8 avril 1970, un puis deus clichés thoraciques
respectivement les 23 septembre et début novembre 1970, avant la sixième
intervention chirurgicale.
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Matériel et méthodes
L'examen cytogénétique a été fait à trois reprises, sur des
fragments ganglionnaires prélevés lors des interventions du 8 avril 1970, du
25 septembre 1970 et du 17 novembre 1970.
Un examen " direct", après incubation en présence de colchicine
pendant deux heures a été fait pour les trois prélèvements, ainsi qu'un
examen après " culture " de 24 et 48 heures pour le premier examen, de 24 et
72 heures pour les deux suivants. La technique employée a été précédemment
décrite (3). Cependant pour les 2e et 3e examens, le choc hypotonique a été
également fait avec une solution de CLK à 10 p. 100 et le séchage de la lame
de préparation dans la flamme d'un bec Bunsen.
Les comparaisons statistiques ont été faites avec le test du
?2.
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Résultats
Les résultats des examens chromosomiques sont résumés dans les
tableaux I et II. Le nombre total de cellules analysées sur photographies a
été respectivement pour les trois examens de 65, 218 et 119, dont 9, 22, et
12 caryotypes établis.
Des anomalies de nombre et de structure ont été observées. Trois
chromosomes " marqueurs " certains (fig. 1) sont présents dans la plupart des
cellules : un chromosome de type Bp- q+, de la longueur d'un chromosome n° 3,
un élément de type Cp- de la longueur d'un des chromosomes des paires 6-8, un
chromosome de type Dq- de longueur équivalente à celle d'un 18 ou d'un F. Dans
quelques cellules cet élément est présent en double exemplaire. De plus, un
des chromosomes de la paire I parait asymétrique, le bras long étant plus
long que celui de son homologue (Iq+) Les mêmes marqueurs sont retrouvés aux
trois examens. Ont été considérées comme normales (N) non seulement les
cellules à 46 chromosomes, mais aussi les cellules incomplètes ne possédant
aucun marqueur. Avec ce critère le nombre de cellules normales observées est
très restreint : 2 cellules sur 65 au premier examen (après 2 heures
d'incubation), 7 cellules sur 119 au troisième examen. Le caryotype des
cellules à 46 chromosomes sans marqueur est celui d'une femme normale : 46,XX.
Le caryotype a été établi également à partir des lymphocytes : c'est celui
d'une femme normale, il n'y a en particulier aucune asymétrie des chromosomes
n° I (fig. 2).
Dans les caryotypes anormaux des cellules tumorales, on note, outre la
présence de marqueurs, des anomalies numériques de certains groupes :
déficit dans les groupes B et C, excès dans les groupes E, F et G. Le nombre
de chromosomes du groupe D est normal, comme celui des paires 2, 3 et I si on
ne considère pas le chromosome Iq+ comme certainement remanié. Malgré
quelques fluctuations de cellule à cellule, les anomalies les plus frappantes
sont la perte constante de chromosomes des groupes B et C, et l'excès plus
variable selon les cellules, de n° 16, de F et de G. La répartition des
chromosomes dans les différents groupes semble peu varier au cours des trois
examens successifs.
Par contre la variation du nombre des chromosomes des cellules
anormales est nette au cours de l'évolution. Le mode est à 47 lors du premier
examen (27/63) et à 46 lors des deux autres (107/218 et 49/112). La comparaison
statistique entre les nombres chromosomiques montre que le nombre de cellules
à 46 et 47 chromosomes est différent au seuil de 1 % entre le 1er et le 2e
examen d'une part, entre le 1er et le 3e examen d'autre part, mais pas entre
les deux derniers examens. Il en est de même si l'on compare les examens faits
après deux heures d'incubation. Le nombre de cellules hypodiploïdes ou
aneuploïdes (différents de 47) n'est pas différent entre le 1er et le 2e
examen ni entre le 1er et le 3e, mais il l'est entre le 2e et le 3e examen.
La comparaison des nombres chromosomiques entre les différents temps
de culture ne peut être faite que pour le deuxième examen. Il n'y a pas de
différence significative entre 2 heures et 24 heures. Par contre la
différence est significative au seuil de 1 % si l'on compare le nombre des
cellules à 47 chromosomes et celui des cellules aneuploïdes (mais pas pour les
cellules hypodiploïdes seules examinées après 2 heures et 72 heures). Il en
est de même pour les cellules à 47 chromosomes examinées après 24 heures et
72 heures de culture. Il semble donc qu'au bout de 72 heures " in vitro ", la
proportion de cellules à 47 chromosomes tende à augmenter.
 Fig. 1. - Caryotype de cellule tumorale à 46 chromosomes.
 Fig. 2. - Caryotype normal à 46
chromosomes (culture de sang).
Tableau I. - Distributions des nombres de
chromosomes.
| Nombre de
Chromosomes | Nombre total de cellules |
23 | 27 | 28 | 33 | 34 | 36 | 37 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 45N | 46 | 46N | 47 | 48 | 49 | 85N | 88 | 90 | 92 | 94 |
I) Durée de culture |
2 heures
| 1 | 1 | | | | | | | 1 | 1 | 2 | 2 | 4 | 5 | | 8 | 2 | 21 | 1 | | | | | | | 49 |
24
heures | | | | | | | | | | | 2 | | | 1 | | 2 | | 1 | | | | | | | | 6 |
48
heures | | | | | 1 | | | | | | | | | 2 | | 1 | | 5 | 1 | | | | | | | 10 |
| 1 | 1 | | | 1 | | | | 1 | 1 | 4 | 2 | 4 | 8 | | 11 | 2 | 27 | 2 | | | | | | | 65 |
II) Durée de culture |
2
heures | | | | | 1 | | | | | | 1 | 3 | 2 | 12 | | 27 | | 5 | 4 | | | | | | | 55 |
24
heures | | | | | | | | | | | 1 | | 5 | 9 | | 33 | | 7 | 1 | | | | | | 1 | 57 |
72
heures | | | 1 | | | 1 | 1 | | | 1 | 3 | 4 | 6 | 5 | | 47* | | 35* | 1 | | 1 | | 1 | | | 106 |
| | | 1 | | | 1 | 1 | | 1 | 1 | 4 | 7 | 13 | 26 | | 107 | | 47 | 6 | | 1 | | 1 | 1 | | 218 |
III) Durée de culture |
2
heures | | | | 1 | | 1 | | 1 | 2 | | 4 | 5 | 6 | 17 | 1 | 31 | 5 | 8 | 4 | 1 | 1 | | | 1 | | 89 |
24
heures | | | | | | | | | | | | | | 4 | | 17 | | 3 | | | | | 1 | | | 25 |
72
heures | | | | | | | | | | | | | | 1 | | 1 | | 1 | | | | | | 2 | | 5 |
| | | | 1 | | 1 | | 1 | 2 | | 4 | 5 | 6 | 22 | 1 | 49 | 5 | 12 | 4 | 1 | 1 | | 1 | 3 | | 119 |
* Dont 4 endomitoses |
Tableau II. - Caryotypes
Nombre de
cellules | 1 | 2 | 3 | B | C | D | 10 | 17-18 | F | G | Dq- | Bp-q+ | CP- | Nombre
de chromosomes |
1er examen |
1 | 2 | 2 | 2 | 2 | 11 | 5 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | | 1 | 44 |
2 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 4 | 5 | 5 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 3 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 5 | 6 | 4 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 10 | 6 | 4 | 4 | 5 | 4 | 2 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 5 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | 1 | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 5 | 5 | 5 | 2 | 1 | 1 | 48 |
1 | 2 | 2 | 2 | 4 | 11 | 6 | 3 | 4 | 6 | 4 | 2 | 1 | 1 | 48 |
2e examen |
1 | 2 | 1 | 2 | 3 | 12 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | | | 45 |
1 | 1 | 1 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 5 | 6 | 5 | | 1 | 1 | 45 |
2 | 2 | 2 | 2 | 4 | 10 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | | 1 | 46 |
1 | 2 | 3 | 2 | 4 | 11 | 6 | 2 | 5 | 5 | 5 | 1 | | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 5 | 5 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 1 | 3 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 6 | 4 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 4 | 11 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 2 | | 1 | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 10 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 45 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 2 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 3 | 3 | 11 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 4 | 11 | 5 | 2 | 5 | 6 | 5 | 1 | | 1 | 46 |
1 | 2 | 3 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 5 | 6 | 5 | | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 5 | 6 | 4 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 13 | 6 | 2 | 4 | 5 | 5 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 5 | 5 | 4 | 2 | 1 | 1 | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 12 | 6 | 2 | 5 | 6 | 5 | | 1 | 1 | 47 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | 1 | 47 |
3e examen |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 4 | 6 | 4 | 1 | 1 | | 45 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 10 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 6 | 5 | | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 10 | 6 | 3 | 4 | 7 | 4 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 10 | 6 | 3 | 4 | 5 | 5 | 2 | 1 | 1 | 46 |
2 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 3 | 4 | 6 | 4 | 1 | 1 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 3 | 6 | 4 | 2 | 2 | 1 | 46 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 13 | 6 | 2 | 4 | 6 | 5 | 1 | 1 | 1 | 48 |
1 | 2 | 2 | 2 | 3 | 11 | 6 | 2 | 5 | 5 | 5 | 1 | 2 | 2 | 48 |
1 | 2 | 2 | 3 | 3 | 11 | 6 | 3 | 5 | 6 | 4 | 2 | 1 | 1 | 49 |
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Discussion
Les anomalies chromosomiques observées dans ce mélanome, sont, comme
il est habituel dans ces tumeurs, à la fois numériques et structurales.
Cependant les anoma-lies observées sont ici avant tout des remaniements de
structure puisque le clone majoritaire est pseudo-diploïde au cours des deux
derniers examens. Les clones pseudo-diploïdes paraissent rare-ment observés
au cours des mélanomes (3, 7, 9 et 11) et le nombre des chromosomes des
cellules tumorales est souvent élevé, hypo-tétraploïdes. Les marqueurs
décrits ont une morphologie variable selon les cas. Les caryotypes de la
tumeur étudiée ici sont relativement homo-gènes. On n'observe pas
d'anoma-lies de la répartition entre les chromosomes 2 et 3 et de déficit
dans le groupe D comparable à ce que nous avons constaté dans d'autres
mélanomes malins (3). Par contre la perte dans les groupes B et C est
retrouvée et suggère que les marqueurs ont été formés, au moins
partiellement, à partir des chromosomes de ces groupes.
Le résultat le plus intéressant concerne à notre avis l'évolution
des anomalies chromosomiques dans le temps : si les aberrations de structure
sont identiques, les nombres de chromosomes par cellule ont dévié en 5 mois
1/2 d'évolution spontanée, passant de 47 à 46. Tout semble donc se passer
comme si l'évolution des anomalies chromosomiques allait, non pas vers un
degré de complexité croissant comme il est habituel au cours des processus
malins, mais vers une stabilisation ou même un degré d'anomalies moindre
alors que de nouvelles métastases loco-régionales apparaissaient.
La comparaison entre les anomalies chromosomiques observées dans les
tumeurs et leurs métastases ou entre plusieurs métastases d'une même tumeur
a donné des résultats variables [revue in Berger, (3)]. Dans l'ensemble
cependant il y a une bonne corrélation entre ces anomalies [discussion in
Atkin (1)], ce qui suggère qu'une tumeur est formée à partir d'un clone,
parfois de deux, plus rarement d'un nombre plus important, il y a relativement
peu de données sur l'évolution des remaniements chromosomiques des tumeurs
dans le temps. Certaines tumeurs, dans lesquelles des différences ont été
trouvées à des examens successifs, ont subi une chimio- ou une radiothérapie,
telles les tumeurs laryngées étudiées par Maeda et coll. (6), le
rabdomyo-sarcome analysé par White et Cox (1 g6 fi), le Iymphome de Burkitt
étudié par Clifford et coll. (4) et le cancer ovarien observé par Visfelt et
Lundwall (10). Slot (8) a observé une déviation du nombre modal de
chromosomes (de 60 à 64) en l'intervalle de 2 mois dans un liquide d'ascite
métastasique d'un cancer gastrique non traité. Benedict et coll. (2) ont
observé une déviation du nombre de chromosomes et l'apparition d'un nouveau
marqueur lors de la récidive d'un méningiome malin. Conen et Erkman (5) pour
leur part, signalent avoir constaté un caryotype similaire lors de l'examen
d'un sarcome méningé et d'une récidive de cette tumeur.
Une évolution spontanée des anomalies chromosomiques peut donc être
observée " in vivo " dans les tumeurs, comme elle l'a été à diverses
reprises dans les leucémies. La particularité de l'observation présentée
ici réside bien dans le contraste entre l'évolutivité du processus tumoral
qui reste cependant purement loco-régional jusqu'à présent, et l'absence
d'aggravation des anomalies chromosomiques. Deux questions se posent alors :
l'absence d'aggravation des anomalies cytogénétiques est-elle la cause de
l'absence de dissémination du processus tumoral ? Est-ce l'existence d'une
réaction immunologique, comme on en connaît dans certains mélanomes, qui
pourrait expliquer l'absence de généralisation cher la malade ? Il est
actuellement impossible de répondre à ces deux questions. Il serait néanmoins
important de comparer l'importance des remaniements chromosomiques des
mélanomes malins, selon que la tumeur est au stade de généralisation ou
seulement au stade de l'extension loco-régionale.
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Bibliographie
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