A la suite des premières observations de l'un d'entre nous (J. de G.)
une investigation systématique des effets de la pronase sur des préparations
chromosomiques a montré que les structures ainsi révélées paraissent
correspondre aux résultats déjà obtenus par l'analyse en fluorescence (1) et
par la dénaturation ménagée (2).
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Technique
Les préparations chromosomiques, obtenues selon les techniques
habituelles [(3), (4)], sont plongées pendant 3 à 6 mn dans une solution
aqueuse contenant 5 mg de pronase pour 100 ml et maintenues à 37°C. Après
lavage et séchage, les lames sont colorées par le colorant de Giemsa.
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Résultats
Les images obtenues sont assez variables d'une cellule à l'autre mais
permettent de préciser les points suivants :
1. Les chromosomes apparaissent gonflés.
2. Les chromatides de chaque chromosome révèlent une succession de
zones très claires et de zones sombres, selon des séquences identiques pour
des points homologues. Il semble que les zones sombres soient moins gonflées
que les zones claires.
3. Pour les chromosomes facilement identifiables (1, 2, 3 p. ex.), les
zones claires ainsi obtenues correspondent exactement aux zones sombres
obtenues par la dénaturation (2). Les zones sombres correspondent aux zones
fluorescentes décelées par la moutarde à la quinacrine (1).
4. Pour l'ensemble du génome, cette corrélation entre les trois
méthodes paraît certaine, mais la structure de chacun des éléments
nécessite une description particulière qui fera l'objet d'un prochain
travail.
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Discussion
Cette méthode de digestion protéique partielle, bien que susceptible
d'amélioration technique, permet de déceler, semble-t-il, des détails encore
plus fins que ceux décrits à l'aide des deux autres méthodes [(1), (2)].
Outre son intérêt pour l'établissement du caryotype, cette
méthode, qui a priori ne modifie que les substances protéiques, fait
considérer que la structure fine des chromosomes ne dépend pas seulement de
la constitution de l'ADN (ADN répétitif p. ex.), mais aussi d'une
architecture protéique complexe.
 Planche 1.
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Bibliographie
(1) T. CASPERSON, L. ZECH et C. JOHANSSON, Analysis of human metaphase
chromosome set by aid of DNA-binding fluorescent adents, Exptl Cell Res., 62,
1970, p. .490-492.
(2) B. DUTRILLAUX et J. LEJEUNE, Sur une nouvelle technique d'analyse
du caryotype humain, Comptes rendus, 272, Série D, 1971, p. 2638.
(3) R. TURPIN et J. LEJEUNE, Les chromosomes humains,
Gauthier-Villars, 1965, p. 23-29, 1 volume.
(4) J. DE GROUCHY, M. ROUBIN et C. BILLARDON, Études chromosomiques à partir de cultures cellulaires. Modifications techniques, Ann. Génét., 13,
1970, p.141.
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