La fréquence de la lacune Xq27 est notablement augmentée lorsque les
lymphocytes de patients atteints du syndrome de l'X fragile sont cultivés en
présence de triméthoprime [2, 4].
Comme cet antibiotique est un inhibiteur de la dihydrofolate réductase,
il nous a semblé utile de comparer son action à celle d'un autre dérivé des
diaminopyrimidines, la pyriméthamine. Utilisé dans la lutte contre le
paludisme, cet antibiotique est un puissant inhibiteur de la dihydrofolate
réductase, trois cents fois plus actif que la triméthoprime [1].
Haut
Essais de toxicité in vitro
Utilisée à la concentration finale de 25 mg/l et de 12,5 mg/l la
pyriméthamine inhibe totalement les cultures de lymphocytes de sujets
normaux.
Des concentrations plus faibles de 1,25 mg/l à 2,5 mg/l sont
compatibles avec une culture normale et un indice mitotique satisfaisant.
Haut
Effets sur la fragilité de l'x
Quatre groupes de sujets sont examinés :
- 6 sujets normaux ;
- 4 mères ou soeurs de patients (porteuses de l'X fragile mais sans
atteinte clinique nette) ;
- 5 garçons atteints de fragilité de l'X (débiles mentaux n'ayant
subi aucun traitement) ;
- 4 garçons atteints de fragilité de l'X (débiles mentaux ayant
préalablement subi un traitement à l'acide folique selon le protocole déjà
publié [3]).
Pour chaque sujet, le même prélèvement de sang est utilisé pour
établir des cultures parallèles, les unes en milieu ordinaire selon la
méthode habituelle [4] les autres en milieu identique mais contenant de la
triméthoprime au de la pyriméthamine. Toutes les lames sont codées avant
l'examen microscopique.
Haut
Sujets normaux (tableau I)
Six prélèvements sont examinés et sur 2 534 mitoses analysées,
aucune lacune n'est décelée au site Xq27.
On peut en conclure que la pyriméthamine (comme on le savait déjà
pour la triméthoprime [l, 2]) ne fait pas apparaître de lacune Xq27 chez les
sujets normaux.
Tableau I. - sujets normaux.
|
Xqfra |
Normal |
| Témoin | 0 | 683 |
| TMP (26,7 mg/l) | 0 | 304 |
| PMT (1,25 mg/l) | 0 | 332 |
| PMT (0,125 mg/l) | 0 | 660 |
| | 2 534 |
Haut
Femmes porteuses de la lacune Xq27 (tableau
II)
Comme le montre le tableau II, la fréquence de la lacune est très
faible dans les cultures en milieu ordinaire : sur un total de 360 mitoses, 8
seulement sont porteuses de la lacune Xq27. La triméthoprime (26,7 mg/l)
augmente nettement cette fréquence (40 cellules porteuses sur un total de 482
mitoses ; ?2 = 14,2
; P < 0.001). Toutefois, seuls les sujets n° 25923 et 26025 révèlent une
augmentation significative, alors que les deux autres sujets paraissent
insensibles à la triméthoprime.
La pyriméthamine (1,25 mg/l) a une action moindre, non
significative (19 cellules porteuses sur un total de 508 mitoses ;
?2 = 1,61 ; P =
0,35). Les essais à 2,5 mg/l et à 0,125 mg/l ne mettent pas en évidence
d'effet de dose. L'ensemble des essais à la pyriméthamine ne révèle aucun
changement significatif des fréquences (8 sur 360 contre 28 sur 755 ;
?2 = 1,7).
Tableau II. - Mères et soeurs porteuses, non
malades.
|
Témoin |
TMP (26,7 mg/l) |
PMT (1,25 mg/l) |
PMT (2,5 mg/l) |
PMT (0,25 mg/l) |
| N° IP |
Xqfra normal (freq) |
| 25923 | 2 | 101 | (0,02) | 19 | 134 | (0,12) | 13 | 187 | (0,06 | - | - | - | 1 | 111 | (0,009) |
| 26025 | 3 | 97 | (0,03) | 14 | 67 | (0,17) | 2 | 63 | (0,03) | 7 | 76 | (0,084) | - | - | - |
| 26023 | 0 | 100 | (0) | 4 | 96 | (0,04) | 2 | 83 | (0,02) | 1 | 51 | (0,019) | - | - | - |
| 25964 | 3 | 54 | (0,05) | 3 | 145 | (0,02) | 2 | 156 | (0,013) | - | - | - | - | - | - |
Haut
Malades non traités (tableau III)
En culture ordinaire, l'examen de cinq garçons atteints de
fragilité de l'X révèle 67 cellules porteuses sur un total de 598 mitoses.
La fréquence varie largement d'un malade à un autre. Après culture et en
présence de triméthoprime (26,7 mg/l) les fréquences sont beaucoup plus
comparables et la lacune est retrouvée dans 147 cellules sur un total de 583
mitoses. Cette augmentation hautement significative, (?2 = 39,2 pour un degré de liberté P
<< 0,001) confirme l'effet déjà signalé [1, 2].
Après culture en présence de pyriméthamine (1,25 mg/l) on observe
aussi une augmentation hautement significative : 177 cellules porteuses sur un
total de 813 cellules (?2 = 27,0 ; P << 0.001).
Cette augmentation est comparable à celle due à la triméthoprime
(?2 = 2,25 ; P #
0,15).
A la dose de 0,125 mg/l la pyriméthamine entraîne encore une
augmentation : 115 cellules porteuses sur un total de 794 mitoses, à la limite
de la signification statistique (?2 = 3,23 ; 0,10 > P > 0,05).
On peut en conclure que chez les malades non traités, l'effet de la
pyriméthamine à 1,5 mg/l est comparable à celui de la triméthoprime à 26,7
mg/l.
Tableau III. - Malades non traités.
|
Témoin |
TMP (26,7 mgl/l) |
PMT (1,25 mg/l) |
PMT (2,5 mg/l) |
PMT (0,125 mg/l) |
| N° IP |
Xqfra normal (freq) |
| 25535 | 1 | 77 | (0.01) | 38 | 134 | (0,22) | 48 | 152 | (0,24) | - | - | - | 11 | 99 | (0,1) |
| 25650 | 3 | 42 | (0,06) | 38 | 107 | (0,26) | 30 | 123 | (0,20) | - | - | - | 5 | 121 | (0,04) |
| 25612 | 3 | 128 | (0,02) | 9 | 48 | (0,16) | 19 | 126 | (0,13) | - | - | - | 2 | 70 | (0,03) |
| 25783 | 19 | 123 | (0,13) | 13 | 73 | (0,20) | 38 | 164 | (0,19) | - | - | - | 44 | 246 | (0,15) |
| 25957 | 41 | 161 | (0,20) | 44 | 74 | (0,37) | 42 | 71 | (0,37) | 37 | 96 | (0,28) | 53 | 143 | (0,27) |
Haut
Malades traités (tableau IV)
Les quatre patients, différents des précédents, ont reçu de
l'acide folique depuis plus de deux mois à la dose de un milligramme par
kilogramme de poids et par jour, per os.
En milieu ordinaire la fréquence de la lacune est très faible (10
cellules porteuses sur un total de 808 mitoses). Ces nouvelles données
confirment l'effet du traitement [3].
La triméthoprime à 26,7 mg/l accroît considérablement cette
fréquence chez le sujet n° 24840. En raison des grandes différences d'un
patient à l'autre, la comparaison simple par le
?2 serait
illégitime. En excluant le patient n° 24840, examiné à deux reprises (à deux
mois d'intervalle) l'augmentation due à la triméthoprime n'est pas
significative pour les trois patients n°5 25570, 24971 et 25045 pris ensemble
(?2 = 2,94 ; 0,10
> P > 0,05), mais reste significative pour les deux patients n° 24971 et
25045 pris ensemble (P = 0,009 selon le test exact de Fisher).
Pour ces trois malades on ne décèle aucune action de la
pyriméthamine, ni à 0,125 mg/l ni à 1,25 mg/l ni à 2,5 mg/l.
C'est seulement chez le patient n° 24840 que l'effet de la
triméthoprime est considérable : 1 cellule porteuse sur 261 en milieu
ordinaire contre 91 porteuses sur 400 en milieu contenant de la triméthoprime
(X2 = 65,9 ; P << 0,0001).
De même, chez ce patient, la pyriméthamine augmente, à deux
reprises, la fréquence de la lacune, qui passe d'une cellule porteuse sur 261
mitoses en milieu ordinaire à 27 sur 368 en milieu contenant de la
pyriméthamine (X2 = 17,4 ; P << 0,001).
Cette sensibilité particulière du patient n° 24840 est d'autant
plus remarquable que ce sujet, notablement amélioré par un traitement à
l'acide folique, a souffert d'une très grave régression neurologique lors
d'un traitement antibiotique prolongé à la triméthoprime. Cette observation,
déjà publiée [1, 2] indique que certains patients atteints de fragilité de
l'X peuvent être excessivement sensibles aux inhibiteurs de la dihydrofolate
réductase.
Tableau IV. - Malades traités.
|
Témoin |
TMP (26,7 mgl/l) |
PMT (1,25 mg/l) |
PMT (2,5 mg/l) |
PMT (0,125 mg/l) |
| N° IP |
Xqfra normal (freq) |
| 25570 | 6 | 170 | (0,03) | 2 | 83 | (0,02) | 2 | 108 | (0,02) | - | - | - | 2 | 102 | (0,02) |
| 24840 | 0 | 183 | (0) | 55 | 145 | (0,27) | 16 | 152 | (0,09) | - | - | - | 0 | 65 | (0) |
| 24840 | 1 | 77 | (0,01) | 36 | 164 | (0,18) | 11 | 189 | (0,05) | - | - | - | - | - | - |
| 24971 | 1 | 170 | (0,006) | 8 | 262 | (0,03) | 1 | 126 | (0,008) | - | - | - | 2 | 241 | (0,008) |
| 25045 | 2 | 198 | (0,01) | 8 | 192 | (0,04) | 3 | 197 | (0,015) | 2 | 164 | (0,012) | - | - | - |
Haut
Conclusions
Cette étude comparative des effets de deux antibiotiques, inhibiteurs
de la dihydrofolate réductase, permet de proposer les conclusions suivantes
:
La triméthoprime et la pyriméthamine ne provoquent pas de lacune
Xq27 chez les sujets normaux.
Chez deux femmes porteuses sur quatre, la triméthoprime augmente la
fréquence de la lacune alors que la pyriméthamine paraît peu active.
Chez les garçons malades non traités la triméthoprime (26,7 mg/l)
et la pyriméthamine (1,25 mg/l) augmentent considérablement la fréquence de
la lacune. On peut estimer qu'à ces doses les deux antibiotiques ont à peu
près la même activité. La pyriméthamine serait donc à peu près 20 fois
plus active que la triméthoprime, alors que son activité inhibitrice de la
dihydrofolate réductase serait 300 fois plus élevée [l]. Cette différence
d'un facteur de 10 entre l'action sur la fréquence de la lacune et
l'inhibition de la dihydrofolate réductase fait penser que le mode d'action de
ces deux substances pourrait être légèrement différent.
Enfin, chez les patients préalablement traités par l'acide folique,
pyriméthamine et triméthoprime sont beaucoup moins actives, sauf chez le
patient qui avait précédemment souffert d'une grave régression lors d'un
traitement antibiotique à la triméthoprime. Il ne parait pas exclu que ce
dernier produit, en plus de son action inhibitrice de la dihydrofolate
réductase, puisse interférer avec une autre étape du métabolisme des
monocarbonés.
En tout cas, il parait absolument souhaitable d'éviter tout
traitement capable d'inhiber la dihydrofolate réductase chez les enfants
atteints de fragilité du chromosome X.
Haut
Références
1. FERONE R., BURCHALL J.J., HITCHINGS G.H. - Plasmodium bergher
dihydrofolate reductase : isolation properties and inhibition by antifolates.
Mol. Pharmacol., 1969, 5, 49-59.
2. LEGRAND N. -Syndrome de l'X fragile et effet de la triméthoprime.
Thèse pour le doctorat en Médecine, Université Paris VI, 1982.
3. LEJEUNE J. - Métabolisme des monocarbonés et syndrome de l'X
fragile. Bull. Acad. Nat. Méd., 1981,165, n° 9, 1197-1206.
4. LEJEUNE J., LEGRAND N., LAFOURCADE J., RETHORÉ M.O., RAOUL O.,
MAUNOURY C. - Fragilité du chromosome X et effets de la triméthoprime.
Génét., 1982, 25, 149-151.
|